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簡要描述：手足口病動(dòng)物模型構(gòu)建：手足口病（Hand, Foot, and Mouth Disease, HFMD）主要由腸道病毒A組（如EV-A71、CV-A16）引起，多見于嬰幼兒，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥。目前主要通過以下動(dòng)物模型研究其致病機(jī)制及疫苗/藥物評價(jià)
更新時(shí)間：2025-06-24 16:13:15
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| 動(dòng)物模型 | 適用病毒 | 優(yōu)點(diǎn) | 缺點(diǎn) | 適用研究 |
|---|---|---|---|---|
| 乳鼠（1-3日齡） | EV-A71、CV-A16 | 高敏感性、可致死 | 年齡限制大 | 病毒致病性、藥物篩選 |
| 幼齡倉鼠（<2周） | EV-A71 | 可模擬神經(jīng)癥狀 | 需適應(yīng)毒株 | 神經(jīng)侵襲機(jī)制 |
| 人SCARB2轉(zhuǎn)基因小鼠 | EV-A71 | 支持病毒復(fù)制 | 需基因修飾 | 疫苗評價(jià) |
| 樹鼩（Tree Shrew） | CV-A16 | 部分模擬人類癥狀 | 來源受限 | 免疫應(yīng)答研究 |
| 非人靈長類（如獼猴） | EV-A71 | 接近人類感染 | 成本高、倫理限制 | 臨床前試驗(yàn) |
研究病毒毒力 → 乳鼠模型（快速、低成本）
研究神經(jīng)致病性 → 幼齡倉鼠 或 SCARB2-Tg小鼠
疫苗/藥物評價(jià) → 樹鼩 或 靈長類
EV-A71（C4亞型、B5亞型等）
CV-A16（主要致輕型HFMD）
CV-A6、CV-A10（新興流行株）
細(xì)胞培養(yǎng)：
RD細(xì)胞（橫紋肌肉瘤細(xì)胞，用于EV-A71/CV-A16）
Vero細(xì)胞（用于部分CV-A6株）
病毒滴度測定：
TCID??（細(xì)胞病變法）
噬斑試驗(yàn)（PFU/mL）
| 途徑 | 方法 | 適用模型 | 特點(diǎn) |
|---|---|---|---|
| 顱內(nèi)注射（IC） | 直接腦內(nèi)接種（乳鼠5μL） | 乳鼠 | 強(qiáng)制神經(jīng)侵襲 |
| 腹腔注射（IP） | 病毒懸液注射 | 乳鼠、倉鼠 | 系統(tǒng)性感染 |
| 肌肉注射（IM） | 后肢肌肉接種 | 乳鼠 | 模擬自然感染 |
| 鼻腔接種（IN） | 滴鼻感染 | 幼倉鼠、樹鼩 | 呼吸道傳播 |
乳鼠（EV-A71）：
顱內(nèi)注射：103–10? TCID??
腹腔注射：10?–10? TCID??
SCARB2-Tg小鼠：10? PFU（肌肉注射）
樹鼩（CV-A16）：10? TCID??（鼻腔接種）
乳鼠：
肢體麻痹、弓背、體重下降（>15%需安樂si）
致死率（感染后5–7天觀察）
倉鼠/樹鼩：
足墊紅腫、行動(dòng)遲緩
神經(jīng)癥狀（震顫、抽搐）
組織病毒載量（qPCR檢測病毒RNA）：
腦、脊髓、肌肉、腸道
病毒分布：免疫組化檢測病毒抗原（如EV-A71 VP1）
中樞神經(jīng)系統(tǒng)：
腦干、脊髓前角神經(jīng)元壞死（HE染色）
小膠質(zhì)細(xì)胞激活（Iba1免疫染色）
肌肉組織：肌纖維變性、炎癥浸潤
體液免疫：ELISA檢測中和抗體（如抗-EV-A71 IgG）
細(xì)胞免疫：
流式檢測CD4?/CD8? T細(xì)胞浸潤
細(xì)胞因子（IL-6、TNF-α）水平
EV-A71需在 BSL-2 實(shí)驗(yàn)室操作，動(dòng)物尸體需高壓滅菌。
乳鼠模型需密切監(jiān)測（每12小時(shí)記錄癥狀）。
設(shè)置人道終點(diǎn)（如癱瘓、體重下降>20%）。
陰性對照：PBS或滅活病毒接種
陽性對照：已知高毒力株（如EV-A71 C4）
解決方案：
使用同窩幼鼠，增加樣本量（每組≥8只）
標(biāo)準(zhǔn)化接種體積（顱內(nèi)注射≤5μL）
策略：
使用免疫抑制劑（如環(huán)lin酰胺）
選擇轉(zhuǎn)基因動(dòng)物（如SCARB2-Tg小鼠）
替代方案：
共飼養(yǎng)感染與未感染乳鼠（通過糞便/唾液接觸）
氣溶膠暴露倉鼠（需專用設(shè)備）
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